Human Uromodulin ELISA kit
规格: KIT
保存: 4℃保存
威奥生物生产的ELISA试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物,加入TMB显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变黄色,检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,靶蛋白浓度与OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。
检测程序:
1. 加样:空白孔加入50μl标准品/样品稀释液,其余孔各加入标准品或待测样品50ul,将反应板混匀后置37℃,40分钟。
2. 洗板:用1×洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,每孔加入1×洗液350μl,每次震荡/浸泡1-2分钟,向滤纸上印干。
3. 空白孔加入100ul生物素化抗体稀释液,其余孔各加入1×的生物素化抗体工作液100ul,混匀后置37℃,30分钟。
4. 洗板:同上。
5. 每孔加入SABC复合物工作液100ul,混匀后置37℃,20分钟。
6. 洗板:同上。
7. 每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul,混匀后置37 ℃暗处反应10-20分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。
8. 每孔加入100ul终止液,混匀,30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
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