2017年5月26日

凝集素芯片

概述:

凝集素(Lectin)是一类广泛存在的蛋白质,能够特异性识别糖结构,糖蛋白和糖脂在细胞中广泛存在。糖基化修饰在细胞的分化,病原与宿主之间的相互作用以及肿瘤的发生、发展和迁移上扮演着重要角色。凝集素是天然存在的,是用于细胞表面糖基化及蛋白质糖基化分析的极佳工具。

 

 

凝集素结合的糖及种类分布

芯片应用:

活细胞表面糖谱变化和差异的检测

活细胞表面相关糖生物标识物的发现

临床标本的糖基化生物标志物分析

目标蛋白质的糖基化分析

 

芯片特点:

  • 芯片有91种凝集素,覆盖几乎所有可商业获得的来源
  • 每张芯片分12个Sub-Array ,同时进行12个样品平行检测
  • 每种凝集素在每个点阵种重复两点
  • 芯片的制备和保存均在低温下进行,充分保证蛋白活性

 

应用案例:

High-Throughput Lectin Microarray-Based Analysis of Live Cell Surface Glycosylation

Current Protocols in Protein Science . 12.9.1-12.9.7, February 2011

Yu Li1, Sheng-ce Tao2,3,4, Heng Zhu2,3, and Jonathan P. Schneck1

 

传统用于检测糖基化的方法是流式细胞仪、蛋白免疫印迹、组织化学和质谱等方法。这些方法既不能显示糖基化的特异性,也不能保证高通量分析。而凝集素芯片的出现解决了这两方面困难,同时也显现出了在早期研究细胞裂解物、细菌等糖基化类型方面的应用前景。

Yu Li等2011年2月,在Schott NexterionR H slides(薄膜图层芯片)上点制110种凝集素(每种样品重复3个点),制备好的凝集素芯片置于4°C下避光保存,备用。然后检测了HEK293活细胞(人胚肾细胞)的表面糖基化情况。

 

参考文献:

1.Zhou SM, et al. Lectin microarray: A powerful tool for glycan related biomarker discovery. Comb Chem High Throughput Screen.2011 ;14:711-9

2.Li Y, Tao SC ,et al. High-throughput lectin microarray-based analysis of live cell surface glycosylation. Curr Protoc Protein Sci. 2011;Chapter 12:Unit12.9

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